细胞培养基瓶顶式除菌过滤器的使用方法、构造和抽滤原理介绍

       培养基除菌过滤装置是在生命科学实验室中被广泛使用的一款基础设备。其主要作用是对配置的培养基进行除菌和除杂质的过滤，以便后续用于细胞培养。下面我们以Sciencetool圣斯特品牌一款R300-500型号为例，来说明该仪器的结构组成、工作原理和具体使用方法。

       培养基除菌过滤装置R300-500构造和组件主要包括以下部分：1台产生负压吸力的无油真空抽滤泵；1组带有真空表的真空调节阀，可以用观察过滤系统内的工作状态，并根据实际需要调节吸力和过滤速度；内置阻尘滤芯的缓冲杯，可以阻挡倒吸的液体和异物直接抽入真空泵内，防止进水和异物造成的意外损坏；1组瓶顶式的真空过滤瓶，该过滤瓶由滤杯、过滤连接座和蓝盖试剂瓶组成，滤杯盛放待过滤的培养基，滤膜铺放在过滤连接座上方的滤膜支撑片上，连接座下部的GL45螺纹可以和蓝盖试剂瓶连接；另有一个带有防倒吸进液阻水保护器的泵管用于连接过滤瓶和抽滤泵。

      具体的过滤原理如下：在过滤前，用户将过滤膜装入滤瓶组内，并进行高温高压湿热灭菌（一般建议121度30分钟）。随后在生物安全柜或者超净工作台内取出瓶组。液体倒入过滤杯后打开抽滤泵。抽滤泵将蓝盖试剂瓶内空气抽走，使得滤器内外形成压力差，外部大气压便可推动培养基通过滤膜。细菌、微生物、杂质等需要被去除的物质被截留在滤膜的表面，从而达到过滤效果。通过滤膜的培养基流入试剂瓶内被保存。

      具体的使用方法主要有以下这些步骤：

1．根据实验要求预先清洗好过滤瓶，如有灭菌要求，除抽滤泵外，过滤瓶组和泵管套件，都可以进行121高温高压灭菌30分钟。灭菌时请将过滤膜预先装好在过滤漏斗内。

2．根据图示，将滤膜平整的铺放在黑色滤膜支撑片上，本型号需要使用直径φ47或50mm的滤膜（材质不限，孔径不限）；滤膜铺好后，将滤杯轻轻放在滤膜表面，并顺时针旋转卡紧滤杯。

3．灭菌后务必烘干，烘干温度不要超过60度，且烘干时间建议在30分钟内，烘干后后尽快拿出，不要长时间保存在烘箱内，会造成塑料件变形。

4．将试剂瓶放置在水平台面上。

5．将过滤连接座拧在试剂瓶螺纹口上，感觉有阻力即可，不要拧死容易造成螺纹的滑丝

6．使用带阻水保护器的泵管连接抽滤泵和过滤瓶组，阻水保护器一侧印有“此面朝泵"，请按照文字示意将该面朝向抽滤泵。

7．将滤液倒入滤杯内，准备开始过滤。

接通电源，打开真空泵上面的电源开关，真空泵启动。

8．过滤过程中，可通过真空调节阀来调节吸力和抽滤速度，调节阀左右旋转即可。

9．工作结束后，先使用调节阀泄压，然后再关机，这样可以避免气压拍打滤液表面溅入泵管内。

10．当感觉设备缺乏吸力、抽滤速度过慢、无法抽吸，或有时可以吸有时又无法吸时（这是由于倒吸的液体可能在环境因素影响下蒸发掉一部分），一般是滤器被倒吸的液体堵塞，需要及时更换。此时可以先判断是否是过滤堵塞，如果连接过滤瓶时，或者拔掉真空泵的泵管用手堵住泵管接口，真空泵仍有压力（指针不低于600mmHg），表示主机正常工作，为阻水保护器堵塞，需要及时更换。