细胞培养基除菌过滤和上清废液抽吸两用真空系统的用途和使用方法介绍

培养基除菌过滤和上清废液抽吸两项操作是细胞培养中不可少的两个环节，一个在实验前期准备，另一个则是后期处理。培养基除菌过滤是一种物理除菌方法，利用微孔滤膜，通常孔径为0.22µm，将配置好的液体培养基中的细菌、真菌等微生物截留，从而获得无菌溶液的过程。这是一种在不破坏热敏感成分的前提下，实现培养基或试剂的无菌化的方法。高压蒸汽灭菌会破坏培养基中的维生素、生长因子、激素等活性成分，因此除菌过滤是制备培养基的标准方法。而培养基上清废液抽吸是指在细胞培养过程中，移除培养容器（如培养皿、培养瓶、孔板）中旧的、已耗尽的培养基、细胞代谢废物或实验处理液的操作。为细胞更换新鲜培养基、进行洗涤步骤（如PBS清洗）或收取特定组分（如上清、细胞）做准备。是维持细胞健康、进行实验干预的常规操作。

在许多实验室中，为了进行这两项操作，往往需要准备两套不同设备分别进行这两项操作，这样会增加设备购置个管理成本。在具体操作时，无论是除菌过滤还是上清废液抽吸，其本质都是利用真空泵产生的负压吸引力。区别在于，除菌过滤是通过负压（真空泵）或正压（注射器推注、蠕动泵）驱动液体通过滤膜，一般实验室由于过滤量不多，常用的是连接真空泵的负压抽滤装置；而上清废液抽吸则是将吸头置于液面处或紧贴容器侧壁底部，利用负压缓慢吸走液体。对于贴壁细胞，可稍微倾斜容器，使液体集中在一角后再抽吸。所以通过精巧的设计，可实现使用一台负压真空系统，同时实现这两项操作，比如圣斯特的L100SAF培养基除菌过滤和上清废液抽吸两用真空系统，下面我们来介绍具体操作使用，帮助客户进一步了解此类设备。

●除菌过滤的操作：

1.取出47或50 mm的滤膜放到过滤转接座滤膜支撑片上，注意使其位于支撑片中间。

2.将过滤杯放置于滤膜的上方，再以顺时针方向轻轻的旋紧，让过滤杯卡住过滤基座。

3.主机机体请使用75%的酒精擦拭消毒灭菌；过滤器、蓝盖试剂瓶和泵管请使用121度高温高压湿热灭菌，不可以使用消毒剂、有机溶剂或者其他清洁剂浸泡、清洗，会造成部件的腐蚀开裂。

4.如果使用的是普通滤膜，建议装入瓶顶式真空过滤器后再一起灭菌；如果使用的是已灭菌无菌包装的滤膜，可以在过滤器灭菌后再装入。

5.将过滤连接座接到GL45标准螺纹口玻璃试剂瓶上，顺时针方向旋紧。

6.将真空过滤瓶插入放置槽内，用泵管连接阻水保护器和过滤连接座侧边泵管接口。

7.将要液体倒入过滤杯中，过滤过程中需要接触的空气是干净无菌的，请在漏斗盖上插上0.2 µm的过滤器，并将漏斗盖盖到过滤杯上，是空气通过滤器再推动滤液。

8.用泵管连接抽滤泵和过滤基座接口，启动主机开始过滤，过滤完后将关机。

9.将过滤杯从转接过滤座上以反时针方向旋开，请依实验程序进一步处理滤膜。

10.再依实验程序进行收集，分析或处理瓶内的溶液。

11.完成过滤后，请将过滤器以清水冲干净，擦干后保存。

●真空集液瓶的链接和操作：

1.将导流延长管接在两孔吸液盖内侧，并按照螺纹的方向拧在试剂瓶上，组成完整的真空吸液瓶，组合完成将吸液瓶插入主机的放置槽内。

2.连接真空泵管和吸液管：取出真空泵管连接阻水保护器和两孔吸液盖的吸气端（AIR）；取出吸液管（2米长一根）连结手持操作器和两孔吸液盖的液体端（LIQ）。

3.完成吸液瓶的组装后，可以参看下一章节“吸液套件组的连接和操作使用"，完成吸液套件的连接。

4.开机开始吸液，可以参看下一章节“吸液套件组的连接和操作使用"，使用对应的吸头适配器来吸液。。

5.注意观察废液瓶的液位，液位过高时应停止吸液，以免液体倒吸入泵。